国产黄色av-爱爱视频网-91久久视频-亚洲视频网-在线国产小视频-日韩69-久久成人在线视频-www.youjizz日本-精品国产视频-台湾swag在线观看-乱h伦h女h在线视频-福利一区在线-三年中文在线观看中文版-在线观看高清av-国产精品视频久久久久久-亚欧精品在线观看-日中文字幕-精品乱码一区二区三区-包射屋-熟女少妇精品一区二区-思思九九热-欧美绿帽合集xxxxx-国产69久久久欧美一级-91精品综合久久久久久-日本精品一区视频

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心利用血清篩選噬菌體文庫PCR擴增的模板

利用血清篩選噬菌體文庫PCR擴增的模板

更新時間:2013-03-16點擊次數:1711

[方法]
1.用無菌塑料吸嘴挑取一個AmpR噬菌粒菌落(直徑大約lmm)并將其轉入到0.2ml MicroAmp反應管中, 內含20u1洗脫緩沖液。在GeneAmp9600 PCR儀中,95℃加熱樣本10分鐘(避免用離心澄清,因為加熱可使細胞碎片黏附在管底)。
2.將菌落提取物作為該克隆的主拷貝保存。另外,這些菌落也可以直接轉移到PCR反應體系中,并在PCR程序中插入加熱步驟。此時,可將克隆主拷貝穿刺接種到在用UV滅菌并鋪有LB—瓊脂培養基+Amp的微板孔中。
3.配置PCR反應體系:將3ul菌落提取物加入到一個0.2ml MicroAmpTM反應管中;反應管包含150nmol/L正鏈引物和反鏈引物、50mmol/L dNTP、0.5%NP-40、Taq緩沖液和1ul AmpllTag DNA聚合酶,終體積為50ul。按以下程序運行PCR反應:94℃10秒、60℃10秒、72℃10秒,共循環30次。
4.在SilentMonitor膜底微板的各孔中,裝入Sephacril“S-300的水性懸液,使每孔中含有400ul穩定床體積介質。用真空過濾器在板底形成真空狀態,
5.吸取各個克隆PCR擴增產物并加入到含有已抽干的Sephacril孔中。真空抽吸收集96孔板中的濾液(PCR擴增模板的大小決定了采用何種凝膠過濾介質:我們發現,Sephacril S-300對分離我們的300bpPCR擴增片段效果*。按照上述流程,無論樣本的處理或收集均比使用商業供應的裝入微量離心管的旋轉柱更加容易和快速,還節省材料成本)。
6.用已純化的PCR產物,按照標準實驗方案進行測序。

m.histay.cn

主站蜘蛛池模板: 91久久久久 | 搞中出| 国产精品一区二区视频 | 国产真实乱人偷精品人妻 | 91久久精品日日躁夜夜躁国产 | 亚洲成人免费电影 | 尤物视频在线播放 | 欧美aaaaa| 国产裸体美女永久免费无遮挡 | 国产伦精品一区二区三区视频女 | 成人一级片 | 北条麻妃一区二区三区 | 成人99| 密臀av| 成人精品一区二区三区 | 免费91视频 | 国产浮力影院 | 无码人妻精品一区二区 | 国产91在线视频 | 中文字幕人妻一区二区三区 | 91porny九色 | 欧美性生交片4 | 99成人 | 无码人妻精品一区二区三 | 91视频精品 | 欧美一二三区 | 嫩草国产 | 午夜aaa片一区二区专区 | av福利在线| 精品人妻无码一区二区 | 久久美女视频 | 国产一级免费 | 在线免费看毛片 | 天堂久久精品忘忧草 | 粉嫩av | 黄色片在线免费观看 | 在线观看免费视频 | 99热这里有精品 | 黄色片在线免费观看 | 国产精品无码一区 | 男人午夜天堂 | 久久久精品一区 | 国产免费小视频 | 亚洲免费在线视频 | 国产成人在线观看免费网站 | 野外(巨肉高h) | 精品欧美一区二区精品久久 | 一区二区三区中文字幕 | 奇米久久 | 日本大尺度吃奶做爰久久久绯色 | 91高清视频 | 日韩视频在线观看 | aaaaa毛片 | 97综合| 午夜精品视频在线观看 | 少妇被按摩师摸高潮了 | 麻豆传媒在线看 | 久久精品视频18 | 小镇姑娘高清播放视频 | 污在线观看 | 人物动物互动39集免费观看 | 国产资源在线观看 | 韩国禁欲系高级感电影 | 足交在线观看 | 黄色在线免费观看 | 欧美日韩一区二区三区 | 97综合| 日韩在线免费视频 | 四虎成人影视 | 老司机午夜福利视频 | 欧美乱码精品一区二区三区 | 一本大道久久久久精品嫩草 | 欧美日韩精品在线观看 | 日韩欧美在线观看视频 | 国产一级18片视频 | 国产又粗又猛又黄又爽无遮挡 | 看一级黄色片 | 亚洲欧美日韩一区 | 日韩国产在线 | 少妇一区二区三区 | 97香蕉碰碰人妻国产欧美 | 天天操夜夜爽 | 成人免费观看视频 | 日韩国产欧美 | 久久大| 五月综合激情 | 图书馆的女友在线观看 | 欧美日韩一区二区三区 | 黄色91| 99热最新 | 久久夜色精品国产欧美乱极品 | 色午夜| 成人网页| 女人床技48动态图 | 交换配乱淫东北大坑性事视频 | 日韩午夜 | 黄色av免费 | 精品人妻一区二区三区日产乱码 | 色戒电影未测减除版 |